Ao amin'ny dingan'ny fanaovana fandalinana fototarazo, matetika isika no mahita santionany RNA tsy ampy, ohatra, amin'ny fandalinana ireo fivontosana anatomika bitika am-bava, eny fa na dia santionan'ny sela tokana aza, ary santionan'ny fiovan'ny fototarazo manokana izay voarakitra amin'ny ambaratonga ambany dia ambany ao amin'ny selan'olombelona.Mazava ho azy fa ho an'ny fitsapana COVID-19, raha tsy eo amin'ny toerana mety ny swab na tsy ampy ny fotoana mandritra ny santionany, dia ho ambany dia ambany ny haben'ny santionany, ka izany no nahatonga ny Vaomieran'ny fahasalamana sy ny fandrindrana ny fianakaviana, roa andro lasa izay ary nandalo ny fitsapana, ary raha tsy naka santionany enina ny santionan'ny asidra nokleika dia azonao atao ny mitatitra izany.
Ny fahatsapan'ny reagent dia zava-dehibe satria manana io olana io na io olana io isika, koa inona no azontsika atao hanatsarana ny fahatsapana ny RT-PCR?
Alohan'ny handinihantsika ny vahaolana azo atao dia ndeha hiresaka fahasarotana roa lehibe amin'ny toe-javatra vao haingana noresahina.
Voalohany indrindra, manahy ny amin'ny fahaverezan'ny RNA isika rehefa misy sela vitsivitsy monja ao amin'ny santionantsika.Raha ampiasaina ny fomba fisarahana sy fanadiovana nentim-paharazana, toy ny fomba tsanganana na ny fomba fanondrahana asidra nucleic, dia mety ho very ny santionany vitsivitsy.Ny vahaolana iray dia ny manampy molekiola mpitatitra, toy ny tRNA, saingy na izany aza, tsy misy antoka fa OK ny fanandramana fanarenana.
Inona àry no fomba tsara kokoa?Ny safidy tsara ho an'ny sela kolontsaina na santionany microanatomical dia ny fampiasana lysis mivantana.
Ny hevitra dia ny manasaraka ny sela mandritra ny 5 minitra, mamoaka ny ARN ao anaty vahaolana, dia atsaharo ny fanehoan-kevitra mandritra ny 2 minitra, avy eo ampio ny lysate mivantana amin'ny réaction transcription mivadika mba tsy hisy RNA very, ary farany dia apetraho mivantana ny cDNA vokarina. amin'ny fanehoan-kevitra amin'ny fotoana tena izy.
Ahoana anefa raha, noho ny teboka fanombohana voafetra na ny habetsahan'ny fanehoana fototarazo kendrena, dia afaka manodina ny RNA rehetra isika ary mbola tsy manome modely ampy hahazoana famantarana tsara amin'ny fotoana tena izy?
Amin'ity tranga ity, ny dingana mialoha amplification dia mety ho tena ilaina.
Ity manaraka ity dia tetika hampitomboana ny fahatsapana aorian'ny fandikana mivadika.Alohan'ny hanombohantsika dia mila manontany any ambany isika hoe inona no tanjona mahaliana antsika, mba hamolavola fototra manokana ho an'ireo tanjona ireo ho an'ny fanamafisam-peo mialoha.
Izany dia azo atao amin'ny famoronana primer mifangaro miaraka amin'ny primer 100 tsiroaroa ary tsingerin'ny fanehoan-kevitra in-10 ka hatramin'ny 14.Noho izany, ny Master Mix natao manokana ho an'ity fepetra ity dia ilaina mba hanamafisana mialoha ny cDNA azo.
Ny anton'ny fametrahana ny isan'ny tsingerina eo anelanelan'ny 10 ka hatramin'ny 14 dia ity tsingerina voafetra ity dia miantoka ny tsy fitoviana eo amin'ireo tanjona isan-karazany, izay zava-dehibe ho an'ny mpikaroka izay mila fampahalalana momba ny molekiola.
Aorian'ny fanamafisam-peo mialoha, dia afaka mahazo cDNA be dia be isika, mba hihatsara ny fahatsapan-tena amin'ny back-end, ary afaka manalefaka ny santionany mihitsy aza isika ary manao fanehoan-kevitra PCR amin'ny fotoana tena izy mba hanafoanana ny fahadisoana mety hitranga.
Fotoana fandefasana: Apr-11-2023